Иследования главных структур возбудителей вич

Поэтому реплицироваться in vitro может лишь малая часть квази-видов ВИЧ из успешно реплицирующихся in vivo, а именно те, которым подходят конкретные предложенные условия «в пробирке». Причем, высевающийся in vitro изолят часто не является доминирующим среди реплицирующихся in vivo. Об этом свидетельствует сравнительный анализ полных последовательностей нуклеотидов геномов изолятов ВИЧ, которые удалось высеять in vitro, изолятов, которые исследовали сразу после непосредственного выделения из тканей организма без стадии культивирования in vitro.

Описаны, кроме того, многочисленные случаи, когда от пациентов не удается высеять ВИЧ in vitro, несмотря на достоверные и подтвержденные доказательства наличия ВИЧ в организме положительная ЦПР, положительные серологические тесты, индикаторная клиника. Таким образом, ложно-отрицательный результат анализа на высеваемость вируса in vitro в принципе закономерен. Ложно-положительных культуральных результатов быть почти не должно. Их возникновение может быть обязано малоуважительным причинам — контаминации тест-культур клеток из-за неаккуратности персонала вирусом иммунодефицита или другими ретровирусами, или недостаточной специфичности методов идентификации ВИЧ в культуре клеток. Последнее, к сожалению, может иметь и объективные причины.

Поэтому положительный результат высева реплицирующегося ВИЧ в культуру клеток in vitro является сильным лабораторным доказательством наличия у пациента инфекции ВИЧ. Существует ряд перевивных технологичных линий клеток человека, происходящих из Т-лимфоцитов или моноцитов, в которых ВИЧ способен эффективно реплицироваться in vitro. Благодаря целенаправленному выведению таких линий в лаборатории R. Gallo стала возможной наработка in vitro препаративных количеств ВИЧ. Без такого методического достижения были бы невозможны ни производство диагностикумов 1-го поколения и последующих, ни интенсивные исследования биологии и молекулярной генетики вируса, определение полной последовательности нуклеотидов его генома и многих производных от последнего исследований и методов диагностики. Однако в целях диагностического высева реплицирующегося ВИЧ от больных и подозреваемых CDC рекомендует в настоящее время, по крайней мере, использовать не перевивные линии клеток, а свежевыделенные в культуру из крови здоровых людей мононуклеарные клетки МКПК. Эта рекомендация основана на эмпирических наблюдениях. По-видимому, интактные лимфоциты человека ближе по своему внутреннему разнообразию факторов способных поддерживать репродукцию ВИЧ, к естественному разнообразию квази-видов ВИЧ из организма человека. Мы опишем базовую методику диагностического высева ВИЧ in vitro.